厌氧培养工作站用于微生物在厌氧(微氧)环境中的接种、连续培养、传代,培养基转换和观察、鉴定等工作。可以控制氧气浓度,模拟体内低氧环境,控制二氧化碳浓度,提供细胞生长的条件。由培养操作室、取样室、气路及电路控制系统、熔蜡消毒器等部分组成。厌氧培养工作站的厌氧环境形成:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
2.通电源开照明灯,开温控仪,调节所需温度;
3.操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示纸(封闭);
4.关紧取样室内外门,并抽真空校验;
5.操作室内*次置换(氮气置换):
A.把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧
B.接通氮气进气路,打开氮气控制阀1,使手套鼓起,关闭阀门1,然后扎紧袋口;
6.操作室第二次置换(氮气置换)重复一次充氮过程,取样室先抽真空,并注意随时用脚踏开关开闭排气。如此连续三次氮气置换。
7.操作室第四次置换(混合气体置换):
(混合气体配比为N285%、H210%、CO25%)
A.调换气路打开混合气阀3进气,充气时取样室先抽真空,并随时用脚踏开关开闭排气;
B.关掉混合气体阀3,并打开阀5,使混合气体经过流量计,调整流量计,流量为每分钟10ml左右;
C.混合气体重复2-3次转换,经过上述过程,基本形成厌氧环境。
8.操作室内打开粑粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一小时后打开美兰指示纸观察其变色,不变色为操作室内达到厌氧环境;
9.开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理,灭菌时间按具体实验自定。